RT-PCR
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RT-PCR (Reverse Transcriptase Polymerase Chain Reaction) #
특정 부위의 RNA를 template로 하여 이에 상응하는 cDNA(complementary DNA)를 합성한 다음 이를 이용하여 PCR 증폭을 시행하는 기술이다.
실험과정 #
- 역전사효소(reverse transcriptase)를 이용하여 RNA로부터 cDNA를 제조
- cDNA를 이용하여 특정부위를 증폭(genomic DNA로부터 특정 유전자 부위를 증폭시키는 방법과 동일함)
장점 #
이 방법은 Northern blot hybridization과 같은 방법을 통해 가능하던 RNA 분석보다 실험방법이 더욱 간단할 뿐 아니라 유전자의 염기서열 결정이 가능하기 때문에 주로 mRNA의 염기서열 및 전사량을 연구할 때 크게 도움이 된다. 염기서열이 알려진 유전자의 경우 RT-PCR을 통해서 전체 길이의 cDNA를 간단하게 합성하여 cloning 할 수 있다.
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