Immunoblotting(면역블롯팅) #

정의 #

항원결정부와 반응하는 항체를 이용하여 단백질 혼합물 중에서 원하는 단백질(항원)만을 찾아내기 위해 특이항체를 반응시켜 항체와 반응하는 항원을 검출하는 면역화학적 검출법.

유사성 #

단백질을 분리하는 방법으로써, 수천 개의 단백질들중에서 특정 단백질을 확인하므로 다른 방법들과 매우 유사하다. (e.g. 서던, 노던 블롯 등) 그로인해 면역블롯팅은 "Western blotting"이라고도 불린다.

과정 #

1. 단백질을 전기영동하여 분리한다.
2. 단백질들이 상대적으로 동일한 위치에 남도록 필터 종이 위에 옮긴다.
3. 비특이적단백질-결합자리를 차단시킨다.
4. 연구대상 단백질에 대한 항체를 필터 종이에 첨가한다.
5. 항체가 결합한 자리는 기질과 작용할 때 빛을 내는 효소를 사용하여 탐지한다.
(이때, 빛을 내는 효소는 항체에 붙어있다.)

그림 1. 모식도 [출처:Google]

용도 #

자기방사법이나 발색성 효소기질의 첨가로 항체와 특이하게 결합된 항원의 밴드를 동정한다.
또한 면역침강반응 등에 비하여 대부분의 검체를 동시에 다룰 수 있다는 장점이 있어 널리 사용되고 있다.