Gateway cloning
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개요 #
Gateway cloning은 DNA sequence를 Site-specific recombination을 통해 vector간의 이동을 쉽게 해주는 기술이며 gene의 방향성을 유지한 채로 이동이 가능하다. 기존의 제한효소를 이용한 Cloning의 방식보다 쉽게 이용할 수 있는 시스템이다.
Site-specific recombination #
Site-specific recombination은 att 사이트라고 불리는 특정 염기서열에 의해서 이루어진다.
박테리오파지 λ가 가지고 있는 att 사이트를 attP, E.coli가 가지고 있는 att 사이트를 attB 라고 부른다. 이러한 attP 와 attB 사이트가 반영하여 각각 attL, attR 사이트를 만들며 E.coli의 Chromosome에 삽입된다.
[출처 : http://jamrany.tistory.com/11]
위의 그림에서 보는 바와 같이 attP 사이트는 243bp이며, common core's sequence라고 불리는 붉은 색으로 표시된 영역은 att 사이트가 모두 가지고 있다.
[출처 : http://jamrany.tistory.com/11]
Entry Clone에는 attL 사이트, Destination Vector에는 attR 사이트가 있으며 이를 통해서(LR Reaction) Expression Clone을 만들 수 있다. 또한 반대로 Expression Clone의 attB 사이트와 Donor Vector의 attP 사이트를 통해 (BP Reaction) Entry Clone을 만들 수 있다.
보다 쉽게 설명되어 있는 사이트들이 있어 아래에 링크를 통해 소개한다.
참고 사이트 #
- http://jamrany.tistory.com/11
- http://jamrany.tistory.com/12
- http://blog.naver.com/kdrbiotech/108577283
- http://blog.naver.com/kdrbiotech/109246018
