Colony PCR
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yhshin@insilicogen.com
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Colony PCR #
세균의 DNA를 extraction 하지 않고, colony의 일부를 Loop % Needle 혹은 멸균된 날카로운 것으로 찍어 바로 튜브에 넣고 PCR반응 시키는 것을 말한다. E.coli나 그 밖에 그람 음성 세균처럼 고온처리로만으로도 세포벽이 쉽게 깨지는 경우에는 이 방법이 시간이나 경제적인 면에서 유리하다.
실험 방법 #
- 세균의 colony 일부를 Loop % Needle 혹은 멸균된 날카로운 것으로 찍어 바로 튜브에 넣는다.
- DW, 10XBuffer, dNTP, Primer 27F, Primer 1492R, ExTaq을 순서대로 넣어 Mixture를 만든다.
- Colony가 들어 있는 튜브에 mixture를 넣어 준다.
- PCR Cycles를 돌린다 (Denat, Anneal, Ext, Finish).
- PCR product가 생산되면 gel을 내려 결과를 확인한 후, 시퀀싱 업체에 보내 염기서열을 확인한다.
